裂解性多糖单加氧酶的生物信息学分析
白琳;丁灿灿;王富豪;路福平;刘夫锋;裂解性多糖单加氧酶(lytic polysaccharide monooxygenase,LPMO)能够催化纤维素等多糖中糖苷键的氧化裂解，在秸秆等农业废弃物的资源化利用中起到关键作用。为进一步探究LPMO的构效关系，利用生物信息学分析技术系统研究了UniProtKB数据库包含的人工校对注释且经过实验验证的115个LPMO。根据其来源统计发现AA9家族有101个，占比高达87.8%。依据遗传距离与聚类关系进行分子进化树分析获得6个组，所有AA9家族LPMO都分布在GroupⅠ—GroupⅤ中，其他3个家族均聚集在GroupⅥ中。分析34个来源于曲霉属(Aspergillus)的LPMO，发现这些蛋白质都具有至少2个铜离子结合位点，且含有5个100%高度保守的序列位点。研究来源于曲霉属LPMO的基序与结构域发现：模体(motif)组成高度相似的LPMO在进化发育关系上较为亲近，但motif的排列顺序不同也会影响催化活性；AA9家族LPMO催化结构域主要具有纤维素降解酶活性，而AA13家族催化结构域主要具有淀粉降解活性。本研究为进一步探明LPMO构效关系提供了理论基础。
酵母菌发酵生产麦角固醇及其提取工艺优化
崔建东;王中杰;耿紫鑫;张照明;贾士儒;为了提高酵母菌发酵生产麦角固醇的产量，通过单因素实验和正交实验对酵母菌产麦角固醇的条件进行优化。优化后的发酵条件为：葡萄糖130 g/L，硫酸铵10 g/L，玉米浆45 g/L，麦芽汁80 g/L，硫酸镁5 g/L，磷酸氢二钾1 g/L，磷酸二氢钾1 g/L，初始pH 6.0，接种量8%，培养温度30℃，发酵28 h。在此条件下，麦角固醇产量比优化前提高了1.08倍，达到0.56 g/L。基于优化后的发酵条件，在5 L发酵罐中进行放大实验，与摇瓶实验相比，麦角固醇产量提高了3.12倍，达到2.14 g/L。对麦角固醇的提取条件进行优化，结果表明：提前用2%硝酸沸水浴回流处理菌体后再进行传统皂化反应提取麦角固醇，相比于直接进行皂化反应更有利于提取麦角固醇。麦角固醇的产量比直接皂化提取增加了22.45%。优化后的提取条件为：2%硝酸预处理菌体后离心洗涤至中性，加入25%KOH溶液和50%乙醇溶液，碱醇比为2∶1，皂化回流4.5 h。在此提取条件下，麦角固醇的产量能够达到1.07 g/L，是优化前麦角固醇产量的2.06倍。
植物乳植杆菌CRISPR基因座分析
宁玉晨;仲飞亮;李秀娟;侯莹;罗学刚;CRISPR/Cas系统是细菌的一种获得性免疫系统，也是合成生物学等领域的重要基因编辑技术。然而，目前人们对乳酸菌CRISPR/Cas系统的解析及其应用开发依然有所不足。本研究对此前分离得到的益生菌新菌株植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)TCCC11824及另外12株同种属益生菌的CRISPR/Cas9系统进行分析。结果发现：13株植物乳植杆菌的CRISPR系统类型均为TypeⅡA型，在CRISPR序列侧翼具有特征性的Cas9及Cas1、Cas2和Csn2。预测到tracrRNA位于Cas9与Cas1之间，但重复序列彼此有所不同，可以形成5个或7个碱基的稳定的二级结构。其中8株植物乳植杆菌CRISPR序列中的spacer序列可以一共靶向12种噬菌体。植物乳植杆菌Cas9蛋白识别最高效的PAM序列为CC。本研究有助于了解乳酸菌进化过程中抵御外源遗传基因侵染的机制，并为其高效基因编辑系统的开发奠定基础。
大豆油脱臭工艺优化与馏出物中维生素E损耗规律研究
于伟洋;于晓莉;胡乃珺;王亮;牛师威;乔丽萍;探究脱臭馏出物中维生素E含量变化规律，不仅可以保障成品油的品质，还可以调控大豆油精炼附加值。本研究结合关键参数和工厂实际，通过研究脱臭温度、汽提量、大豆油脱臭馏出物(SODD2)循环温度等参数对脱臭馏出物中维生素E含量变化的影响规律，采用单因素实验及正交实验方法，筛选最佳工艺参数。结果表明：脱臭是维生素E精炼损耗的主要工段，其损失率约为21.93%；馏出物SODD1和SODD2中维生素E的含量分别达到15 724.70 mg/100 g和3 801.38 mg/100 g。脱臭馏出物中维生素E的含量随着脱臭温度、汽提量和SODD2循环温度的升高而增加，且提出率呈现相似趋势。综合分析，条件采用脱臭温度250℃、汽提量0.8%、SODD2循环温度55℃时，脱臭馏出物中维生素E的总含量达到25.70%，且优化后的提出率为13.52%，较优化前提升了3.31%。研究结果可为油脂精炼保质增效提供一定参考。
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